リアルタイム細胞増殖測定機器（がん・ウイルス研究）

　MAESTRO ZHTシリーズの特長（MTTアッセイとの比較を含む）

　384ウェルで経時的な細胞傷害性試験

従来（MTTアッセイ等のエンドポイントアッセイ）の測定では、測定毎にウェルを使用するため、同一の細胞を継続して測定できないことと、一度に多くのデータを取得できないことが大きな課題でしたが、Maestro ZHTシリーズを用いることで、これらの課題が克服できます。Maestro ZHTシリーズは、非侵襲的・ラベルフリーで細胞の増殖をリアルタイムに測定し続けることができ、長期間（～週）にわたり同一ウェル内の細胞の挙動を測定できます。この結果、ウェル間差なく連続したデータを取得することができます。また、Maestro ZHTは、384ウェルフォーマットを使用し、ハイスループットアッセイに対応できます。

Maestro ZHTシリーズで取得できるデータの模式図
同一ウェルを継続して長時間測定でき、一枚のプレートで多くの条件を設定できます（下図）。

従来試験（MTTアッセイ等）で取得できるデータの模式図
データ取得の際に各ウェル内の細胞を使用することから、経時変化を測定するためには多くのウェルを準備する必要があります（下図）。このように多くのウェルを準備しても、同一のウェル（細胞）を継続して測定することはできず、ウェル間差による誤差が生じます。

スループット性を高めた新製品

最大8枚のプレートを同時に測定

　　　 MAESTRO TrayZ　　

　Maestro TrayZの紹介動画

　MAESTRO TrayZの特長

　Point 1　　一台で複数のプレートの測定が可能

Maestro TrayZは、一台で4枚のプレートを測定することができます。さらに一つのコンピュータで2台のTrayZを制御することができ、一度に8枚のプレートを測定することが可能です。従来のMaestro ZHT/Zの特徴である簡便な操作性やユーザーフレンドリーなソフトウェアのまま、スループット性を高めました。

　Point 2　　インキュベータ内に設置

Maestro TrayZは、薄型・コンパクトな形状をしており、インキュベータの中に設置して使用します。通常の細胞培養にしているインキュベータが使用可能です。制御のためのコンピュータはインキュベータ外にあり有線で制御します。

デスクトップに設置可能な一体型

誰でも簡単に測定

　　　 MAESTRO ZHT/Z　　

　Maestro ZHT/Zの紹介動画

　Point 2　　インキュベータ機能内蔵、ボタン一つで簡単測定

Maestro ZHTシリーズはボックス型の装置となっていて、本体で温度、CO₂濃度が自動制御されます。そのため、他の機器でみられるように、専用のインキュベータを準備し、その中に機器本体を入れる必要がありません。細胞を播種した専用プレートををセットするだけで、すぐに測定が開始できます。
機器の制御およびデータ解析のためのソフトウェアも付属しているので、細胞調整から測定・データの解析まで一貫して非常にスムーズです。

　専門家のコメント

海外ユーザーによるウェビナー

海外ユーザーによるウェビナーがAxion社サイトで公開されています。下のボタンをクリックしてください。

鎌状赤血球症
演者：Professor. Manu Platt. (Georgia Institute of Technology)
Maestro Zを用いて鎌状赤血球病モデルにおける血管壁の透過性を評価しています。

COVID-19 Study
演者：Prof. Christopher FB. (Georgia State University)
新型コロナウイルスの複製抑制に関して、VPS34の2つの低分子阻害剤と、脂質代謝に関与する2つの阻害剤の機能を評価しています。

Plant-derived pectin as a breast cancer therapy
演者：Dr. Cheryl G. (University of Georgia)
変性シトラスペクチン（MCP）は、がんの転移防止剤として有望視されています。細胞のインピーダンスをリアルタイムで定量的にモニタリングし、がん細胞の遊走能に対するMCPの効果を評価しています。

Targeting glioblastoma: Assessing the potency of T cells to kill cancer
演者：Dr. Lohitash K. and Meghan L. (University of Georgia)
グリオーマ細胞にヒトT細胞を添加し、CAR-T細胞研究におけるin vitroインピーダンスベースのアッセイの有用性を紹介します。

論文紹介

Maestroシリーズを使用している文献情報をお知らせします。

Acetate, a metabolic product of Heligmosomoides polygyrus, facilitates intestinal epithelial barrier breakdown in a FFAR2-dependent manner. Int J Parasitol., S0020-7519(22)00085-6.
Schälter F, Frech M, Dürholz K, et al. (2022).

FTH promotes the proliferation and renders the HCC cells specifically resist to ferroptosis by maintaining iron homeostasis. Cancer Cell Int., Dec 29;21(1):709.
Hu W, Zhou C, Jing Q, Li Y. et al. (2021).

β-Asarone Attenuates Aβ-Induced Neuronal Damagein PC12 Cells Overexpressing APPswe by Restoring Autophagic Flux. FrontPharmacol., Jul 28;12:701635.
Li Z, Ma J, Kuang Z, Jiang Y. (2021).

A versatile polypharmacology platform promotes cytoprotection and viability of human pluripotent and differentiated cells. Nat Methods., May;18(5):528-541.
Chen Y, Tristan CA, Chen L. et al. (2021).

　製品仕様

(1) Maestro ZHTシリーズ比較表

(2) 専用プレート

Maestro ZHT, Zの測定にはインピーダンス測定用の専用プレートが必要です。384ウェルプレートは、Maestro ZHTで使用できます。96ウェルプレートは各ウェルの底面の一部が透明なので、細胞の形態が観察できます（384ウェルプレートは細胞の観察ができません）。
左図：96ウェルプレート。右図：96ウェルプレート上の細胞

ウェル数	入数	製品名	製品番号
96	5	CytoView Z, 96 Black	Z96-IMP-96B-5
384	5	CytoView Z 384 Black	Z384-IMP-384B-5

　T細胞によるがん細胞傷害性試験（キリングアッセイ）

(１) グリオーマ細胞（U87 ）の増殖によるインピーダンスの変化

ヒトグリーマ細胞（U87細胞）を、3種類の播種密度（10,000, 25,000, 50,000細胞）で播種して、インピーダンスの変化を測定しました。細胞の増殖に伴い、培養プレート底面のインピーダンスが増加していきます。

(２) 活性化T細胞の添加による細胞傷害性評価

T細胞を添加していない条件では、継続してインピーダンスが増加していますが、活性化したT細胞を添加する（下記グラフの灰色の線）とU87細胞が攻撃され、インピーダンス値が減少します。このように、インピーダンス値を指標として、経時的にT細胞の効果を評価できます。

3種類の播種密度（10,000, 25,000, 50,000細胞）で播種した細胞のそれぞれの条件で、活性化されたT細胞を添加しました。インピーダンス値が０になる点を100％のCytolisysとして、各条件での結果を表した（左図）。さらに付属ソフトを用いることでCytolisysが50％となる時間を求めてグラフが作成できます（右図）。

　ソフトウェア

AxIS Z

AxIS ZはMaestro Zを制御するソフトウェアで、プレートや実験条件の設定を行います。さらに各電極由来のシグナルをリアルタイムで確認しながら、データの取得ができます。取得したデータを解析して、グラフ等を作成して、エクスポートまで対応しています。